Kinetoplastid paraziták cisztein peptidázai


Részt vesznek a sejtes folyamatokban, például a gyulladásban és a szövetek homeosztázisában. A PG-termelés nem korlátozódik a többsejtű szervezetekre.

A tripánosomatidok szintén szintetizálnak az arachidonsav számos metabolitját. Ennek ellenére biológiai szerepüket ezekben a korai elágazó parazitákban, valamint a gazda-parazita kölcsönhatásban betöltött szerepüket nem tisztázzák jól. Ezenkívül korábban pozitív korrelációról számoltak be az L.

Az Lbr PGF2S lokalizációjának vizsgálata csontvelő eredetű makrofág fertőzés során az amasztgotumokban mCherry-Lbr PGF2S-t expresszáló parazitákat készítettünk, és ezt 48 órás fertőzés után 48 perces időtartamú képalkotás követte. Eredmények A Leishmania braziliensis promastigotok a prosztaglandint F 2α szintetizálják arachidonsav jelenlétében, csúcstermelésük pedig az álló növekedési fázisban hőstressz alatt.

Az Lbr PGF2S egy citoplazmatikus protein, amely dúsul a parazita sejttest szekréciós helyén, a flagellar zsebben. Ez egy enzim, amelyet konstitutíven expresszálnak a promastigote fejlesztés során, de az Lbr PGF2S túlzott expressziója növeli az in vitro fertőzőképességet. Ennek a gyulladást elősegítő lipid-mediátor szintézisben részt vevő enzim feltételezett transzferje a gazdasejtre potenciális szerepet játszik a gazda-parazita kölcsönhatásban, és részben megmagyarázhatja az Lbr PGF2S túlzott expressziójával járó fokozott patogenitást az L.

Adataink értékes betekintést nyújtanak a parazita eredetű lipid mediátorok jelentőségének megértéséhez a patogenezisben.

После паузы, показавшейся ей вечностью, она прошептала: - Коммандер. И в тот же миг осознала свою ошибку.

A nyálkahártya-elkötelezettség az L. A brazíliai endemikus területről származó betegek otorinolaringológiai vizsgálata az orrnyálkahártya parazitáját a korai fertőzés során, nyálkahártya-elváltozások hiányában fedezte fel [3]. Egy korábbi vizsgálatban gén expressziós analízist végeztünk két páciens nyálkahártya és bőr bőr L. Az összehasonlító proteomikai elemzés következetesen differenciált mintázatot mutatott a prosztaglandin F 2α szintáz expressziójában Lbr M. A Tri TrypDB-n tritrypdb.

Az Lm PGF2S fehérje szerkezetét kristályosítással oldottuk meg [5], megkönnyítve ezzel a fehérjével végzett gyógyszer-tervezési jövőbeli tanulmányokat. A prosztaglandinok PG szintézisét és funkcióit jól jellemzik, főleg az emlősök fiziológiája szempontjából.

Emlősökben a prosztaglandinszintetázok katalizálják a prosztaglandinok termelődését, szubsztrátumokként az arachidonsav AA metabolitjait felhasználva. A PGH 2 ezután prosztaglandin szintézissel pl. Emlősökben a PGF 2α leginkább az ovulációval, a luteolízissel, a méh összehúzódásával és a szülés megkezdésével kapcsolatos [7].

Nemrég arról számoltak be, hogy a PG-termelés nem korlátozódik az emlősökre, és ezek előfordulnak tripánosomatidokban [6] és más protozoán parazitákban, például a Plasmodium falciparum [8] és az Entamoeba histolytica [9] [10].

A prosztaglandin F2α szintázaktivitást három trypanosomatid ortológ gén esetében kimutatták. Roberts és munkatársai [12] kimutatták, hogy a hiteles ciklooxigenázok hiánya ellenére ezek a paraziták arachidonsavat használnak szubsztrátumként a PGF 2α előállításához. Ezenkívül ezek és más szerzők bebizonyították, hogy ezek közül néhány a kinetoplastid aldo-keto reduktázok metabolizálják a toxikus ketoaldehideket, méregtelenítő szerepet játszanak, és valószínűleg szerepet játszanak a sejtvédelemben [12, 13].

Ezen útvonalak fontosságát a parazitabiológiában és a gazdaszervezet kölcsönhatásában azonban továbbra sem vizsgálják meg.

Ezenkívül a Leishmania infantum chagasi vizsgálata kimutatta, hogy a PGF2S nagymértékben expresszálódik a metaciklusos promasztgotumokban [14]. Ezek a hpv névtelen megfigyelték a lipidtestek az emlőssejtekben a prosztaglandin szintézis helyei növekedését az L. Vizsgálatunkban megvizsgáltuk a PGF 2α termelést az L.

Eredményeink arra utalnak, hogy az Lbr PGF2S átkerülhet az intracelluláris parazitákból az egér makrofágok citoplazmájába. Ez a munka másokkal együtt [4, kinetoplastid paraziták cisztein peptidázai súlyt ad arra a hipotézisre, hogy a PG-k parazita virulencia faktorok.

Az igazításokat a Geneious v6-ban jelenítettük meg. Ezt követően Western blot vizsgálatokat végeztünk Alves-Ferreira és munkatársai szerint.

a rák jele abban a hónapban

A transzfektáns kolóniákat Magar tápközegből extraháltuk G antibiotikum jelenlétében Sigma-Aldrich, St. Az Lbr PGF2S-t extraktoxpresszáló parazitákat állítottuk elő és tartottuk a [4] pontban leírtak szerint.

A makrofágokat késői stacionárius fázisú Leishmania promastigotumokkal MOI 1 fertőztük.

  1. Schistosomiasis granuloma képződés

A prosztaglandin receptor FP gátlása érdekében a fertőzött makrofágokat prosztaglandin F2α- dimetil-amiddal Cayman Chemical, Michigan, USAFP receptor antagonista kezelte 24 órán keresztül vagy 48 órán keresztül. A rögzített sejteket centrifugáltuk, 1 M glicin oldatban szuszpendáltuk és fedőlemezekhez rögzítettük.

A képeket Zeiss LSM konfokális mikroszkópon nyertük. A képeket fluoreszcens mező nm gerjesztés és nm emisszió és fényes mező felhasználásával készítettük, hogy 18 perces videókat készítsünk.

A prosztaglandin F 2α adagolása A prosztaglandin F 2 α- t az L. Először, megerősítettük a szekvencia homológiáját a prosztaglandin F 2α szintáz gének között a Leishmania spp. Ezután elemeztük az Lbr PGF2S jelenlétét a helyhez kötött promastigote tenyészet felülúszójában az inokulum utáni 7.

a genitális szemölcsök megnyilvánulása

A promatigotákat centrifugálással távolítottuk el, és a felülúszókat 0, 22 μm fecskendőszűrőn szűrtük, kivéve a parazitákat, de nem a vezikulákat, például az exoszómákat. Az Lbr PGF2S-t immunoblot módszerrel detektáltuk mind a parazita lizátumokban, mind a tenyészet felülúszójában 2b.

Но система безопасности АНБ была лучшей в мире. Никому даже близко не удалось подойти к базе АНБ, и у агентства не было оснований полагать, что это когда-нибудь случится в будущем. Вернувшись в лабораторию, Чатрукьян никак не мог решить, должен ли он идти домой. Неисправность «ТРАНСТЕКСТА» угрожала и базе данных, а легкомыслие Стратмора не имело оправданий.

Ábraamely szekréciós organellent mutat a trippanosomatidákban. Annak igazolására, hogy az axenikus L. Az értékelés előtt a sejteket 26 ° C vagy szemölcsök férfiaknál és nőknél ° C hőmérsékleten tartottuk kinetoplastid paraziták cisztein peptidázai órán át arachidonsav AA jelenlétében vagy hiányában.

vastagbél tisztítása a máj méregtelenítése előtt

Valamennyi vizsgált körülmények között megfigyeltük a PGF 2α szint növekedését a felülúszóban, amikor AA-t adtak hozzá. A hatás különösen a 37 ° C-on tartott mintákban volt nyilvánvaló 2d ábra.

Anti-Tubulin antitestet használtunk a fehérjeterhelés ellenőrzéséhez.

Parazitamentes M tápközeget M használtunk negatív kontrollként. A blotokat Ponceau S-vel A HPP gyógyítható panel megfestettük a fehérjeterhelés ellenőrzése céljából. Egyetlen promastigote képe látható a jobb alsó sarokban; egy erős fluoreszcencia jel jelenik meg a flagellar zsebben fehér nyíl. Ab kontroll: paraziták, amelyeket ugyanazon címkézési eljárás alá vettek primer ellenanyagok nélkül.

A mennyiségi meghatározást promasztgotumokkal végeztük a 3. Az adatok átlag ± szórás három ismétléstől. Ezek a konstrukciók kiküszöbölik az Lbr PGF2S antitest makrofágmolekulákkal való keresztreakciójának problémáját.

Az mCherry konstrukciók helyes integrációját a riboszomális lókuszban PCR-rel igazoltuk 1. A PGF2α útjának az L. Az FP-gátlás csökkenti a L. Az mChPGF2S fluoreszcenciáját elsősorban az intracelluláris promasztgotumokban detektálták a fertőzés korai szakaszában. Meglepő módon, kb.

a gyermekek számára a férgek, a gyógyszer megelőzésére

Ne feledje, hogy ebben az időben a paraziták nem voltak teljes mértékben differenciálódva amasztgotumokká, bár a legtöbb génexpressziós változás a differenciálódás ezen kezdeti szakaszában zajlik [18]. Ezt a festési mintázatot nem figyelték meg az Lb [mCherry] intracelluláris parazitákban 4.

A Leishmania Braziliensis Prosztaglandin F 2α Szintáz Hatással Van A Gazdaszervezet Fertőzésére

Az mChPGF2S fluoreszcencia eloszlását a gazdasejt citoplazmájában egyértelműbben megfigyelték a nagyobb számú intracelluláris parazita makrofágokban 5a. Ábra, 8. Ennek ellenére még csak két mChPGF2S parazitával fertőzött kinetoplastid paraziták cisztein peptidázai mutatták a fluoreszcencia szétszórtságát az egész sejttest körül, míg az mCherry parazitákkal fertőzött makrofágok fluoreszcenciája a vákuum régióra korlátozódott promasztigok és amasztotok 5b.

A ciánt álnévként használtuk; az egyes panelek jobb alsó részén található számok órát: percet jelentenek a fertőzés után. Kinetoplastid paraziták cisztein peptidázai a 4. Méretezés: 5 μm Teljes méretű kép 5. Az egyes képek tetején lévő számok órát: percet jelentenek a fertőzés után. A fehérje a flagellar zsebön keresztül választódhat ki, amint azt az immunfluoreszcencia során detektált erős jel jelzi.

Ezek az eredmények megerősítik és kiterjesztik a korábbi vizsgálatokat, amelyek azonosították a PGF2S-t az L. Mivel a PGF 2α termelődését prémium-konjugátumok alapján határoztuk meg axenikus tenyészetben, feltételezzük, hogy az Lbr PGF2S ugyanolyan katalitikus méregtelenítő kúra vélemények rendelkezik.

Legjobb tudomásunk szerint azonban mi vagyunk az elsők, akik megfigyelték, hogy az Lbr PGF2S amasztgotumokban expresszálódik és a Leishmania-val fertőzött gazdasejt citoplazmájában lokalizálódik.

Más szerzők kimutatták, hogy a Leishmania által in vitro vagy in vivo fertőzés során felszabaduló vezikulák zavarják a gazdasejt válaszát [20]. Nemrégiben kimutatták, hogy a promasztiótok titkos exoszómákat vezetnek a homoklegyek középső lumenébe, és ezeket az extracelluláris vezikulumokat parazitákkal a bőrbe visszaszorítják a vér étkezés során, modulálva a Leishmania fertőzés immunválaszát.

Bár más kísérletekre van szükség az Lbr PGF2S szekréció megerősítéséhez, eredményeink arra utalnak, hogy az enzim átjut a fertőzött makrofágok citoplazmájába. A gazdasejt citoplazmájában szekretált egyéb fehérjékről, például a gpról kimutatták, hogy modulálják a fagocitikus sejtválaszt [22, 23]. Az a folyamat, amellyel a PGF2S eléri a gazdasejt citoplazmáját, ismeretlen, de kimutattuk, hogy a prosztaglandin receptor gátlása negatívan befolyásolta a BMDM fertőzési profilját in vitro.

Noha a PGF 2α-val kapcsolatos legtöbb vizsgálat emlős nőstény szaporodással kapcsolatos [7, 24], kimutatták a leukocita migrációban kinetoplastid paraziták cisztein peptidázai szerepüket, nagy potenciállal bírnak neutrofil kemoattraktánsként in vitro [25] és in vivo [26].

melankólia és szomorúság giardiasis betegsége

Ezen túlmenően az AKR1C3 bőségesen termelődik az epidermisz suprabasális rétegének keratinocitáiban, és kalcium jelenlétében szabályozza a PGF 2α szintézisét, hozzájárulva a gyulladáscsökkentő válasznak in vitro [27]. Így más, különböző Leishmania fajokat használó kutatók munkája [6, 14] és saját adataink arra utalnak, hogy a PGF 2α jelátviteli útvonal részt vehet a Leishmania patogenitásában.

Videó: Род Лейшмании – Leishmania 2021, Augusztus

Következtetések Legjobb tudomásunk szerint ez az első tanulmány, amely arról számolt be, hogy az L. Az irodalmi eredmények alapján javasoljuk, hogy a PGF2S előállítása javítsa a parazita fitneszét, és szerepet játszhasson az emlős gazda-parazita kölcsönhatásában.

Az Lbr PGF2S új Leishmania virulencia faktor lehet, ezért potenciálisan vonzó célpont a gyógyszerek felfedezésében vagy az oltások fejlesztésében.

Adatok és anyagok elérhetősége A cikk következtetéseit alátámasztó adatok a cikkben és annak kiegészítő fájljaiban találhatók.

A proteázok Absztrakt A metakaspázok MCA-k cisztein-peptidázok, amelyeket növényekben, gombákban és protozoákban fejeznek ki, kaszpáz-szerű hisztidin-cisztein katalitikus színezékkel, de különböznek a kaszpázoktól, például szubsztrátspecifitásukban. Az MCA-k szerepe vita tárgyát képezi: a sejtciklus szabályozásában, a sejthalálban vagy a sejtek túlélésében szerepet játszottak.